高壓蒸汽滅菌操作原理:高壓蒸汽滅菌就是將滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內,通過加熱產生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中驅盡,關閉排氣閥,繼續加熱,待沸點高于100℃的溫度,菌體蛋白質凝固變性就會達到滅菌。在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時,滅菌鍋內冷空氣的排除是非常重要的,飽和蒸汽的滅菌,水蒸汽中含有空氣時,在同一壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度!
1.
高壓滅菌鍋的水加到水位線;
2.將需滅菌的培養基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內,關閉鍋蓋,檢查排氣閥、安全閥狀態(上下排氣閥打開安全閥關合然后加熱,方便空氣排出,上、下排氣閥都同時處于開啟狀態待有水蒸汽從上、下閥溢出,此狀態保持7、8分鐘后,即排出空氣后上排氣閥關合,下排氣閥調小,安全閥保持關合狀態);
3.打開電源,檢查參數設置是否正確,然后按下“work”鍵,滅菌鍋開始工作;自動派冷氣,到105℃時,底部排氣閥門自動關閉,然后壓力開始上升;
4.壓力升至0.15MPa(121℃)時,滅菌鍋再次自動放氣,然后開始記時,一般培養基滅菌20min,蒸餾水滅菌30min;
5.達到規定的滅菌時間后,關閉電源,打開放氣閥緩慢放氣;當壓力指針降至0.00MPa時,放氣閥無蒸汽排除時,方可開啟鍋蓋,操作過程,請注意安全,小心燙傷。
同一溫度下,濕熱的殺菌效力比干熱大:
1.濕熱的穿透力比干熱大;
2.濕熱的蒸汽有潛熱存在,每1克水在100℃時,由氣態變為液態時可放出2.26kJ(千焦)的熱量。這種潛熱,能迅速提高被滅菌物體的溫度,從而增加滅菌效力。
3.蛋白質較易凝固,因蛋白質含水量增加,所需凝固溫度降低。